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Western Blot快速实验攻略
4.转膜与封闭 1)将胶浸于预冷的转膜缓冲液中平衡 5min。(如果检测小分子蛋白质,可省略该步骤,因小分子蛋白容易扩散)。2)依据胶的大小剪取膜和滤纸 6 片,放入预冷的转膜缓冲液中平衡 10...
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Western Blot 快速封闭液
1.完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。2.根据膜的大小,加入适量体积的 Western Blot 快速封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5×8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。 3.置于水平摇床上,室温条件下...
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Western Blot 快速封闭液
1.完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。2.根据膜的大小,加入适量体积的 Western Blot 快速封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5×8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。3....
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Western封闭液
封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。按照每张膜封闭需要 5-10 毫升封闭液计算,一个包装的 Western 封闭液可以封闭 10-20 张膜。【 试剂盒组成 【运输及储存条件】 4 ℃保存,一年有效。 【 注意事项 】 1. 通常在室温封闭 60 分钟即可。如果对于一些背景非常高的抗体,可以 4 ℃封闭过夜。 2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【 使用说明 】 完成转膜后,
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帮助中心
4、封闭(Blocking) 转膜完毕后,立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中,漂洗1-2分钟,以洗去膜上的转膜液。从转膜完毕后所有的步骤,一定要注意膜的保湿,避免膜的干燥,否则极易产生较高的背景。用微型台式真空泵吸尽洗...
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大规模做western
1. 大规模的质检抗体,速度要快,WB的操作流程熟练是关键。WB的各个环节一个也不能少,但是我们可以通过分解的方式来将一次WB实验分解为两次,从而缩短每次实验时间。
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增强化学发光法(ECL)
12.转膜后,膜上其他的空白位置需要用封闭液封闭。Western的灵敏度某种程度上受限于封闭做的好不好。脱脂奶是最常用的经济配方,用这种封闭剂由于里面可能有痕量的生物素和碱性磷酸酶,可能造成背景污染而不适合生物素-亲和素的检测方...
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艾美捷
49、转膜后的脱脂奶粉封闭液是 5%的 TBST 脱脂奶粉”,其中 TBST 最后那个 T 是 Tween 吗,浓度多大?答:是 Twe...
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Western blot
一抗溶于封闭液二抗溶于 PBST配制 SDS-PAGE 的浓缩胶也称堆积胶、积层胶、上层胶选择合适的分离胶(下层胶)浓度根据目的蛋白的分子量大小选择丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体...
转膜后为什么要封闭
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