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Western无蛋白快速封闭液
6. 与PVDF膜相比,NC膜需要更长时间的封闭。● 使用说明:1. 本产品无需稀释,开盖即用。2. 完成转膜后,使用TBST漂洗转印膜3次,每次5分钟; 3. 将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入...
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Western无蛋白快速封闭液
6.与PVDF膜相比,NC膜需要更长时间的封闭。使用说明: 1.本产品无需稀释,开盖即用。2.完成转膜后,使用TBST漂洗转印膜3次,每次5分钟;3.将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入10-20 ml 无蛋白快速封闭液完全覆盖转印膜,置于...
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Western快速封闭液
6.与PVDF膜相比,NC膜需要更长时间的封闭。使用说明: 1.本产品无需稀释,开盖即用。2.完成转膜后,使用TBST漂洗转印膜3次,每次5分钟;3.将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入10-20 ml快速封闭液完全覆盖转印膜,置于摇床轻轻...
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Western Blot快速实验攻略
4.转膜与封闭 1)将胶浸于预冷的转膜缓冲液中平衡 5min。(如果检测小分子蛋白质,可省略该步骤,因小分子蛋白容易扩散)。2)依据胶的大小剪取膜和滤纸 6 片,放入预冷的转膜缓冲液中平衡 10...
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wb 失败原因分析
降低一抗浓度,改变一抗孵育时间和温度(尽量4℃过夜,此孵育条件比37℃1h要温和很多),并提高封闭液浓度。7、目标带是空白,周围有背景,是为什么? 答:你的一抗浓度较高,二抗上HRP催化活...
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封闭液(Western)
封闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。 按照每张膜封闭需要5-10毫升封闭液计算,一个包装的Western封闭液可以封闭10-20张膜。详细介绍 保存温度 2-8℃ 注意事项 试剂拆封后请尽快使用完! 有效期 一年 使用注意事项 1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。 2. 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。3. 样品或试剂被
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Western blot 条带分析
问题 可能原因 验证或解决办法 背景高 封闭不充分/未加封闭剂 延长封闭时间 更换合适的封闭剂(脱脂奶粉、血清、BSA等) 一抗浓度过高 增加一抗稀释倍数 抗体孵育温度过高 4℃孵育 二抗非特异性...
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WesternBlotting技术详解.ppt
电压或电流 膜的选择 封闭 封闭未吸附蛋白的疏水结合位点,以减少非特异性结合背景的影响。室温封闭1h-2h。一抗二抗孵育 一抗:一般是用待测蛋白免疫动物A(如兔、鼠),获得的多克隆或单克隆抗体,如小鼠抗人NGF 二抗:另一种动...
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Western blot
一抗溶于封闭液二抗溶于 PBST配制 SDS-PAGE 的浓缩胶也称堆积胶、积层胶、上层胶选择合适的分离胶(下层胶)浓度根据目的蛋白的分子量大小选择丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体...
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蛋白免疫印迹(Western Blot)技术手册
Ø避免用直接接触膜,应使用镊子,手指上的油脂与蛋白会封闭转膜效率并易产生背景污斑 Ø排列三明治时,尽量用移液器或15ml试管赶除胶与膜之间的气泡,或将三明治放在装有的培养皿中以防止气泡产生,请戴手套! Ø确认裁剪的膜和滤纸...
转膜后为什么要封闭
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